A l'attention des nouveaux arrivants, passagers de plus ou moins courte durée, voici quelques informations ou conseils concernant le labo de génétique et amélioration.
Et pour tous les moins nouveaux, ces indications sont évidemment toujours d'actualité!
La personne qui est votre maître de stage est responsable de votre encadrement au laboratoire et se doit de vous expliquer la bonne marche de celui-ci. Afin que vous ne soyez pas submergé par ces premières informations, voici un petit guide écrit.
Chaque pièce ou labo a une une activité spécifique (cf plan ci-joint):
- (1) Extraction d'ADN
- (2) Laverie
- (3) Salle réfrigérée contenant les congélateurs à - 80°C
- (4) Coloration nitrate d'argent pour grands gels et machine à glace
- (5) Electrophorèse bidimensionnelle
- (6) Coloration BET
- (7) Migration sur gel d'acrylamide
- (8) Chambre froide et centrifugeuses
- (9) Migration sur gel d'agarose
- (10) Salle PCR
- (11) Salle Séquençage
- (12) Salle de radioactivité
Par conséquent aucune paillasse n'est attribuée à quelqu'un. Il est donc indispensable de laisser la paillasse aussi propre qu'on l'a trouvée (si jamais cette dernière n'était pas nickel, prenez votre courage à deux mains et nettoyez-la).
Pour les différents matériels comme par exemple les balances, centrifugeuses, n'oubliez pas de les nettoyer après chaque utilisation et de les éteindre. N'hésitez pas à demander des conseils aux plus anciens quand vous doutez de
la mise en marche ou de la bonne utilisation d'une machine comme la caméra pour enregistrer les gels colorés au BET ou les séquenceurs pilotés par le micro attenant ou le fluorimètre ou ...
La préparation des solutions utilisées (tampon de migration, etc), est réalisée par celui qui vide la dernière bouteille. Le remplissage des boîtes de pointes ou des bocaux d'eppendorfs sont effectués régulièrement par tout le monde (avant de lancer un autoclave, on vérifie qu'il n'y a pas un stock de boîtes vides).
Ne laissez pas au copain le plaisir de le faire à votre place!
Videz les poubelles de BET dans la soute à l'aide du petit charriot.
La pièce stock contient tous les produits et matériels couramment utilisés. Quand vous prenez l'avant dernier flacon (ou sac) de produit (ou matériel), n'oubliez pas d'inscrire sur le classeur rose des commandes la référence de ce dernier (et la quantité requise) afin que Guy ou Catherine en passent la commande.
L'approvisionnement en azote liquide est effectué à la faculté de Bordeaux. Ne pas s'y prendre à la dernière minute quand on prévoit d'en consommer. Le dossier de remplissage se trouve dans le bureau de Guy .
Les solvants et l'éthanol sont stockés dans une soute à l'extérieur du labo. En demander la clé qui se trouve dans le bureau de Guy quand vous avez besoin de ces produits.
A la réception d'une commande, vérifier que le contenu de la commande est complet, noter sur le classeur rose l'arrivée du matériel et déposer sur le bureau de Guy le bon de réception que vous aurez signé.
Pour ce qui concerne toute commande d'oligonucléotides, un contrat a été passé avec un fournisseur, les commandes sont donc centralisées par Catherine à qui vous devez envoyer par mail les séquences des oligos dont vous avez besoin (catherine.bodenes@pierroton.inra.fr).
Dès réception des amorces, aliquoter la solution stock et préparer parallèlement des aliquots prêts à être dilués pour la solution de travail (par exemple déposer dans des tubes eppendorf 4 µl de solution stock à 100 µM auxquels vous ajouterez au moment de l'utilisation 196 µl dH2O ou Tris 10 mM, pH8 pour une concentration finale de 2 µM).
ta vaisselle tu laveras, le rangement tu feras, la paillasse tu dégageras,
l'information tu laisseras, nouveau tu formeras correctement.
Un classeur vert est en libre accès dans le labo ''migration acrylamide''.
Voici cependant quelques informations de base.
Produits chimiques:
- acides
Les acides fortement concentrés sont à manipuler sous hotte ou sorbonne.
- acrylamide :
Produit neurotoxique, commandé maintenant uniquement en solution liquide, il est à manipuler impérativement avec des gants. Après polymérisation, on peut le jeter dans une poubelle ordinaire.
- mercaptoéthanol, formaldéhyde, diméthylsulfoxide = DMSO à utiliser sous la sorbonne.
- solvants
Après utilisation, les solvants sont récupérés dans des bidons marqués ''déchets'' qui sont ensuite stockés dans la soute à déchets en attente de leur traitement.
- azote liquide
Des containers servent au stockage de l'azote liquide et sont utilisés pour son transport. Les principaux risques liés à son emploi sont les brûlures lors d'un contact prolongé avec la peau, et l'asphyxie lors d'une ébullition massive dans un local fermé.
- autoclave
Le descriptif pour sa mise en route est collé sur le mur juste à côté.
Manipuler avec précaution lors de l'ouverture les objets chauds. Les risques liés à son usage sont les brûlures par contact ou projection.
- bromure d'éthidium (BET)
Le BET est un puissant mutagène. Son usage est rigoureusement limité à la salle ''coloration BET''. Manipuler les gels colorés au BET avec gants et blouse. Jeter ensuite gels et gants dans la poubelle en carton. Ne jamais regarder les UV sans protection.
Les usagers du BET nettoient à tour de rôle la salle tous les mois environ.
Pharmacie
Une trousse à pharmacie se trouve sur le bureau de Guy ; elle contient :
un coussin hémostatique, 1 bande toile 4mx10cm, 2 couvertures isothermiques, 2 sacs plastiques, 2 écharpes triangulaires, 12 épingles de sûreté‚1 boite de 11compresses stérilisées 30x30 cm, 1 rouleau de sparadrap 5mx2cm, 5 pansements adhésifs individuels 2x6cm, 1 pince à échardes, 5 pansements adhésifs individuels 4x6cm, 1 paire de ciseaux lister 15cm, 3 bandes extensibles , 10 gants vinyle à usage unique s/ sachet, 3 bandes extensibles 3mx10cm, 1 rouleau micropore,1 boite Doliprane, 1 bain oculaire,1 flacon Mercryl, 1 Biafine (brûlures),1 Hémoclar, 1 Eosine, 1 Polaramine (antistaminique ).
Un bain oculaire à usage unique est à disposition sous la sorbonne du labo d'extraction , un dans la salle BET.
